Петербургские ветеринары разработали тест, позволяющий выявлять геморрагический энтерит у индеек без лаборатории
Геморрагический энтерит индеек — одна из главных угроз для индейководческих хозяйств. Болезнь вызывает вирус из семейства аденовирусов: он бьет по иммунной системе птицы, уничтожая клетки, которые отвечают за выработку защитных антител. Индейка оказывается беззащитной сразу перед несколькими инфекциями. Внешне болезнь проявляется кровавой диареей, резкой слабостью и обезвоживанием. Вирус распространяется стремительно: за короткое время он способен охватить большую часть поголовья на птицефабрике.
Прежде у российских ветеринаров не было удобного способа быстро поставить диагноз прямо на месте. Один из доступных методов — реакция диффузионной преципитации, при которой антитела и вирусные белки взаимодействуют в специальной гелевой среде и образуют видимые полосы. Метод несложный, но результата приходится ждать двое-трое суток. Другой вариант — полимеразная цепная реакция (ПЦР). Этот метод точнее, но требует дорогостоящего оборудования, специально подготовленных специалистов и нескольких часов тщательной работы в лаборатории — малейшая ошибка при выделении генетического материала ведет к недостоверному результату.
Новый метод основан на реакции латекс-агглютинации. Агглютинация — это склеивание: крошечные латексные частицы с закрепленными на их поверхности антителами к вирусу добавляют к вытяжке из органов предположительно больной птицы. Если вирус есть — частицы слипаются в хлопья, заметные без всякого микроскопа. Если вируса нет — суспензия остается однородной. Все это происходит прямо на обычном пластиковом планшете за 10 минут.
«Запрос от птицефабрик на такой способ диагностики существует давно. Индейководство в России растет, и все чаще регистрируется данная болезнь, а диагностика, к сожалению, отставала — не было ничего простого, быстрого, доступного прямо в хозяйстве. Эта разработка как раз закрывает этот пробел: берешь материал, наносишь на планшет, добавляешь латексные частицы и через 10 минут видишь результат. Никакой лаборатории, никакого сложного оборудования», — рассказал один из главных разработчиков данного способа Дмитрий Красков, ассистент кафедры эпизоотологии СПБГУВМ, младший научный сотрудник отдела вирусологии ВНИВИП.
Чтобы добиться надежного результата, ученые перебрали несколько десятков вариантов реакции: меняли тип и размер латексных частиц, подбирали буферные растворы с разной кислотностью, экспериментировали со способами получения и очистки антител. Лучшим сочетанием оказался карбоксилированный латекс диаметром 200–400 нанометров с трис-HCl буфером. Карбоксилированный — значит с особыми химическими группами на поверхности, которые обеспечивают прочное сцепление с антителами. Сами антитела получают из крови индеек, предварительно привитых против вируса геморрагического энтерита.
У метода есть одно ограничение: он не различает патогенный и вакцинный вирус. Там, где применяется живая вакцина против геморрагического энтерита, тест будет давать положительный результат вне зависимости от реального состояния птицы. Там, где живая вакцина не используется, новый диагностикум работает в полную силу.
«Индейководство — одна из стратегически важных отраслей для продовольственной безопасности страны. Наша задача как университета — не просто проводить фундаментальные исследования, но и превращать их результаты в конкретные инструменты, которые работают прямо на производстве. Разработка отечественных диагностических систем — именно такой путь от науки к практике», — отметил Кирилл Племяшов, ректор СПбГУВМ, член-корреспондент и профессор РАН, доктор ветеринарных наук.
Исследование выполнено при поддержке Российского научного фонда и Санкт-Петербургского научного фонда. До появления этой разработки в России был зарегистрирован лишь один диагностический набор для выявления геморрагического энтерита — и тот рассчитан исключительно на лабораторные условия. После регистрации новый тест может стать доступным инструментом для птицефабрик по всей стране.